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影響色譜柱性能的物理參數有哪些?

更新時間:2024-01-08      點擊次數:390
HPLC(高效液相色譜)是一種常用的分析技術,被廣泛應用于化學、生物、醫藥等領域。色譜柱是HPLC系統中的核心部件,通常由填料材料和柱壁組成。填料材料可以是各種各樣的,比如疏水相和親水相。而柱壁則是填料與流動相之間的隔離層,它能夠保護填料的結構,同時也能影響分離效果。
 
影響色譜柱性能的物理參數有哪些?
 
(1) 硅膠純度
 
硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質會影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發生拖尾。
 
(2) 色譜柱尺寸
 
填料床的長度和內徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節約溶劑,可減少橫向擴散,但壓力較大,對系統要求較高。
 
(3) 顆粒形狀及粒徑
 
球形顆粒柱效高、重現性好、柱床結構均勻,不規則形柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。
 
(4) 顆粒表面積
 
顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m2/g表示,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態,更適合梯度洗脫程序。
 
(5) 孔徑
 
顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍是80~300Å,大孔徑的填料顆??梢匝娱L大分子溶質在填料表面的滯留時間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。

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